香樟,古稱“豫章”,為樟科樟屬亞熱帶常綠闊葉喬木。香樟材質優(yōu)良,紋理雅致,香氣濃郁,不僅是提取純天然香料的重要原料,也是城市綠化、園林景觀的良好樹種。據(jù)報道,現(xiàn)在提取樟樹香料已由過去砍伐大樹提取,改為密植矮林、割取樹葉提取的方式。但香樟采用扦插、嫁接等無性繁殖擴繁較困難,且母株材料來源有限,無法滿足規(guī)模生產(chǎn)的需要;種子繁殖則實生苗后代分離嚴重,多數(shù)劣變,且育苗時發(fā)芽遲緩,苗木參差不齊。而采用離體培養(yǎng)不僅能實現(xiàn)工廠化生產(chǎn)優(yōu)良香樟,而且能夠保持母本的優(yōu)良特性。目前,國內對香樟的組織培養(yǎng)已經(jīng)進行了不少探索,并取得了一定的成效。為了更好地推進香樟的生產(chǎn)發(fā)展,本文就近年來香樟的組培快繁技術的研究進展作一綜述。
無菌外植體的選擇
目前,用于香樟組織培養(yǎng)的外植體主要是幼葉、嫩莖、莖段、嫩芽和未成熟的幼胚。如王長憲等認為,由于香樟內生菌較重,因而采用多菌靈溶液對3年生的香樟樹枝條進行催芽培養(yǎng),結果表明:培養(yǎng)1周后多數(shù)枝條開始萌芽,2周后新芽長到0.5一2.5cm;而吳幼媚等則以當年萌發(fā)的嫩枝為外植體,研究發(fā)現(xiàn),2月份無菌活體的獲取率最高,達60%;其次是3月,獲取率為46%;而氣溫較高的6一9月,無菌活體獲取率最低。
培養(yǎng)基配方選用
基本培養(yǎng)基
在香樟組織培養(yǎng)過程中通常使用的基本培養(yǎng)基是MS、改良MS、1/2MS,按培養(yǎng)目的的不同進行調整。吳金壽等認為,以改良Ms為基本培養(yǎng)基的組合,其誘導系數(shù)最高,苗況較好未見褐變;而以MS為基本培養(yǎng)基的組合有褐變死亡現(xiàn)象:以1/2MS為基本培養(yǎng)基的組合誘導系數(shù)最低,且莖葉變?yōu)闂椉t色。辜夕容等研究表明,全量Ms大量元素的培養(yǎng)基為最適芽生長培養(yǎng)基,含半量MS大量元素的培養(yǎng)基最適于香樟莖段的愈傷組織生長。索長江等研究認為,Ms加50一100mg/L的NaH2P04可提高叢生芽的質量,降低斷莖和葉褐死現(xiàn)象,同時高NH4+和NO3一是必需的。在MS培養(yǎng)基中加人Ca(NO3)2,一方面可以給苗木提供更多的ca2+,同時N03一能促進植物對K+、ca2+、Mg2十等陽離子的吸收;另一方面避免了初始芽的褐化。
外源激素
2.2.1外植體的誘導香樟外植體誘導過程中施加的細胞分裂素一般選用6-BA,生長素一般選用NAA和IAA。吳金壽等研究表明,芳樟莖段用改良MS+6-BA2mg/L+NAA0.lmg/L固體培養(yǎng)基,誘導系數(shù)最高,培養(yǎng)巧d后陸續(xù)分化出不定芽,苗況較好未見褐變。王長憲等研究發(fā)現(xiàn),香樟側芽的分化受NAA的影響較大,在加人一定量的6-BA情況下,再加人0.lmg/LNAA對側芽誘導初分化效果明顯;在對香樟葉片愈傷組織誘導時,附加BA和2,4一D的配比為1:4能提高愈傷組織的誘導率。辜夕容等則認為,6-BA濃度越高,對香樟莖段上隱芽的萌動與伸長越有利,低濃度6-BA有利于愈傷組織的生長;培養(yǎng)基中NAA濃度越高,香樟莖段上愈傷組織長得越好,但過低或過高則不利于香樟莖段隱芽的萌動與伸長,而在濃度適中(0.05mg/L)時,腋芽才長得最好;同時6-BA與NAA的濃度比過低或過高均不利于香樟莖段隱芽的萌動與伸長,只有在6一BA/NAA為40時,萌出的腋芽最長,較低配比則有利于促進愈傷組織的形成。因此認為MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.O5mg/L為香樟莖段初代培養(yǎng)的最適培養(yǎng)基,而l/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.lmg/L可用于產(chǎn)生愈傷組織。吳幼媚等則認為6-BA4一5mg/L十IAA2mg/L是香樟叢生芽誘導的理想激素組合。
(第一苗木站 香樟種植管理技術專題)